奶牛（niú）貝諾（nuò）孢子蟲病的病因分（fèn）析 奶（nǎi）牛貝諾孢（bāo）子蟲病的預防措施

貝諾孢子蟲病（bìng）是一種對牛、馬、羚羊、鹿和駱駝傷害極大（dà）的一種慢性（xìng）寄生性的（de）原蟲病，患病動物會有皮（pí）膚（fū）脫毛和增厚的特性，此病分部較廣。下麵大家一起（qǐ）來了解一下：奶牛貝諾孢子蟲病的病因分析 奶牛貝諾孢子蟲病的預（yù）防措施。

1、發病情況

黑龍江省大慶市某奶牛場飼（sì）養的277頭奶牛（niú）中有7頭成年奶牛發病，出現明顯的臨床症狀。牛群常規免疫正常，發育狀況良好，1星期前2隻奶牛出現（xiàn）精神沉鬱、厭食、背部脫毛（máo）、皮膚增厚等症狀，但未引起飼養員重視，病情逐步發展，牛（niú）群中已有（yǒu）7頭成年奶（nǎi）牛出現臨床症狀。就診前該牛群飼喂過伊維菌素結（jié）合氟苯尼考進行治療，但病情未見好轉。

2、臨床（chuáng）診斷

對患牛進行視診（zhěn）和（hé）觸診（zhěn），如皮膚、鞏膜、關節。這些發病牛有一些共同（tóng）的臨床症狀，包括膝關（guān）節腫大（dà），淺（qiǎn）表（biǎo）淋巴結腫脹，在鞏膜及結膜處有針尖（jiān）大小的丘疹（zhěn），皮膚增厚硬化，特別是（shì）在乳房（fáng）、肘、肩和脖子（zǐ）處（chù）尤為明顯。此外，水腫和紅斑在這些處也較為明顯，但是（shì）患牛並未感到任何的瘙癢。由以上臨床症狀（zhuàng），筆者初步推測這些發病奶牛患了貝諾孢子蟲病。

3、實驗室診斷

顯微鏡觀察。選擇患牛背部症狀明顯處，用打毛剪將背部皮膚（fū）處（chù）多餘的毛清理（lǐ）幹淨，用70%酒精將欲取樣部位擦拭消毒後，用眼科鑷采（cǎi）集患（huàn）病皮膚表麵的乳突狀小結節，裝於無菌的采樣（yàng）瓶中，帶回實驗室。將結節剪碎，在顯微鏡（jìng）下仔細觀察，發現大量疑似貝諾孢子蟲的包囊。

分子生物學診斷。利用DNA提取（qǔ）試劑盒提取患牛血液中的基因組總DNA。利用本課題組先前發表的貝諾孢子蟲PCR診斷（duàn）方法來擴增目的片段‘1]。上遊引物BesITSIF(　5´-TGA　CAT　TTA　ATA　ACA　ATC　AAC　CCT　T　3　7)和下遊引物BesITSIR(5　7　GGT　TTG　TAT　TAA　CCA　ATC　CGTGA　3　7)，PCR反應為25uL體係，反（fǎn）應條件為：95℃5　min;95℃1　min、50℃45　s、72℃1　min，共35個循環，最後72℃延（yán）伸7　min。PCR擴增產物於o．8%瓊脂糖凝膠電泳儀中進行檢測。結果（guǒ）顯示7頭患牛均成（chéng）功擴增出貝諾孢子蟲（chóng）的目的條帶。基於臨床症狀觀察、病（bìng）原檢測和分子（zǐ）生物學方法，確診這些奶牛為貝（bèi）諾（nuò）孢子蟲病。

4、病因（yīn）分析

貝諾孢子蟲的終末宿主為貓，而牛（niú）是其（qí）中間宿（xiǔ）主。當終末（mò）宿主食入含有（yǒu）貝諾孢子蟲包囊的肉品後，其在終末宿主體內（nèi）以裂（liè）殖生殖進行增殖，最終形成卵囊隨分別排出體外，卵囊在外界環境中孢子化稱為感染性階段的卵囊，被中間宿主牛食（shí）後感染。據報道，牛群之間也可以傳播貝諾（nuò）孢子蟲（chóng）病，主要通（tōng）過吸（xī）血的昆蟲（chóng），如牛虻，將病（bìng）牛血液中（zhōng）的（de）貝諾孢子蟲滋養體在牛群中傳播[3]。本（běn）次（cì）牛貝諾孢子蟲病發生於七八月份，其流行時間與吸血昆蟲的活躍時間有密切關係。另外，還有報道指出，牛的眼淚中也存（cún）在貝諾孢子蟲的速殖（zhí）子，而（ér）且該病可以通過一些吸食眼淚的昆蟲傳播（bō）[4]。筆者分析該場奶（nǎi）牛患病就要原因（yīn）是吸血昆蟲（chóng）牛虻的傳播，在奶牛（niú）場見到了大量牛虻，同時也發現許多蠅類在吸牛的眼淚，也存在蠅類傳播的（de）可能性。

5、預防措（cuò）施

鑒於貝諾孢子蟲病的治療尚無特效藥（yào）物，因此（cǐ）對於該病的預防（fáng）尤為重要。對於該病的預防，奶牛場應該做到以下幾點。首先，建立貝諾（nuò）孢子蟲病快速準確的診斷方法，這是防控奶牛貝諾孢子蟲病的根本。其次，需要建立健（jiàn）全奶牛貝諾孢子蟲的評價係統，一旦有疑似病例的出現，立刻進行隔離或捕殺處理，徹底根除該病的傳染源。第三，由於昆蟲在貝諾（nuò）孢子蟲（chóng）病在牛（niú）群中傳播的重要性，因此對（duì）於該病的流行區，建議在昆蟲活躍期使用殺蟲劑來（lái）消滅傳播源。

奶牛貝諾孢（bāo）子蟲病的（de）病原體
貝諾孢子蟲屬孢子蟲綱、真球蟲目、肉（ròu）孢子蟲科、貝諾屬(Besnoitia)，在（zài）牛寄生的為貝氏貝諾孢子蟲(B.besnoiti)。孢子蟲的包囊（náng）寄生於病畜的皮膚、皮下、結締組織（zhī）、筋膜、漿膜、呼吸道粘膜（mó）和鞏膜（mó）等許（xǔ）多部位。包囊色灰白，形（xíng）圓，呈細砂粒樣，肉眼剛能辨認，一般散在、成團，或呈串珠狀排列。包囊直徑約（yuē）為100μm-500μm，囊壁由宿主組織所形成，分兩層（céng）：外層厚，均質，呈嗜伊（yī）紅性；內層較薄，內合許多扁平的巨核，囊內無中隔。包囊內含有大量（liàng）緩殖子（zǐ）(囊（náng）殖子（zǐ）)，其大小（xiǎo）平均為8.4μm×1.9μm，呈香蕉形、新月形（xíng）或梨形，一端尖（jiān），一端圓、核靠近中（zhōng）央。在急性病（bìng）牛的血塗（tú）片中有時可見速殖子(內殖子)，其形態、構（gòu）造與緩殖子相似，大小平均為5.9μm×2.3μm。
流行（háng）病學
貝氏貝（bèi）諾孢子蟲的(beishibeinuobaozichongde)終末宿主為貓，天然中（zhōng）間宿主為牛和（hé）羚羊、兔、小鼠等。但其特征病變主要（yào）發生於天然中間宿主。發病有（yǒu）一定季節性，吸血昆蟲可能是傳播者和宿主。主要傳播途徑是消化道。
致病作用（yòng）
牛吞食了由貓排至外（wài）界環境（jìng）中並已發育成具有（yǒu）感染性的卵囊後，其中的（de）子孢子（zǐ）便被釋出，經胃腸道粘膜進入（rù）血液循（xún）環，在真（zhēn）皮（pí）、皮下組織、筋膜和上呼吸道粘膜等部位的血管內皮（pí）細胞裏進行內雙（shuāng）芽增（zēng）殖，產（chǎn）生大量速殖子。速殖子隨細胞破壞而被釋出，再侵入其他細胞繼續產生速（sù）殖子（zǐ）。這一過程的不斷進行，逐漸刺激機體產生相應的抗體，使機（jī）體抵抗力增強，從而發生（shēng）機體（tǐ）反應，將速殖子包裹而形成包囊，此時速殖子便從組織中消失。但包（bāo）囊中的速殖子變成了發育較緩慢的緩殖子。當貓采（cǎi）食了牛體內的包囊（náng）後，其中的緩殖子在小腸粘膜上皮細胞和固有層中變為裂殖體，進行裂殖生殖和（hé）配子（zǐ）生（shēng）殖（zhí），形（xíng）成卵囊隨糞便排出。卵囊在外界進行（háng）孢子（zǐ）化形成，含有兩個孢子囊，每個孢子囊又有四個子（zǐ）孢子。這種卵（luǎn）囊即變為感染性卵囊。
症（zhèng）狀
首先出現體溫升高，1-4周皮膚可見包囊。牛群（qún）發病率1%-20%，病死率約10%。臨床上可分為三期。
：病初體溫升高至40℃以上，持續2-5d。病畜畏光，喜陰暗。被毛無光，腹下、四肢有時全（quán）身發生水腫。步伐僵硬。呼（hū）吸、脈搏增數。反（fǎn）芻減少或停止，偶見下痢。孕牛可發生 流產（chǎn）。頸淺和髂下淋巴（bā）結腫大。流淚，角膜渾濁，鞏膜充血，其上可見針尖大灰（huī）白色蟲體（tǐ）包（bāo）囊。鼻粘膜潮紅，也有許多包囊。流漿（jiāng）液性、化（huà）膿性或血膿性鼻液。如咽喉受害（hài）則有咳嗽。此期約經5-10d。
：被毛脫落，皮膚增厚、龜裂，流出混血的漿液。病畜長（zhǎng）期臥地，發（fā）生褥（rù）瘡。前期水腫消退（tuì），肘、頸、肩部（bù）發生硬痂（jiā）。此期約（yuē）半月至1月，病畜如（rú）不死亡則轉（zhuǎn）為下一期。
幹性皮脂溢出期：在發生過水腫的皮膚（fū），其被毛大都脫落，皮（pí）膚上形成一層厚（hòu）痂，似患蟎病的皮膚或象皮。淋巴結仍腫大。病畜沉鬱、無力。公（gōng）牛睾丸初期腫大，前期萎縮。
病理變化
除症狀中所述病理變化外，屍體剖檢時，見病部皮（pí）下因組織增生而肥厚。常在（zài）頭部、四肢、背（bèi）部、腰部、臀（tún）部、股部等皮下組織、筋膜及肌間結締組織中，見大量（liàng）灰白色圓（yuán）形貝諾（nuò）孢子蟲包囊。輕症時包囊僅見於四肢尤其下部的皮膚，重症時全（quán）身（shēn）皮下及後肢的跟腰、韌帶、趾深與趾淺屈腰、腓腸肌腱、外側伸肌腱及與腱膜相連的肌組織都有包囊形成。此外，包囊巡可寄生（shēng）於（yú）舌、軟齶、咽喉、氣管、肺實質、胃腸道粘膜及大網膜（mó）等處。
：皮膚與皮下組織：包囊主要寄生於真皮乳頭層和皮下結締組織中，偶見於表皮。病初表皮過度角化，並因細胞明顯增生而肥厚。真（zhēn）皮下（xià）的結締組織因孢子蟲寄生而明顯增生，其間有較多淋巴細胞和嗜酸性（xìng）粒細胞浸潤，皮脂腺、汗腺和毛囊萎縮（suō）甚至消（xiāo）失。
肌肉：包囊多散在於骨骼肌纖維間，偶寄生於纖維內。如（rú）包囊變性壞（huài）死，其中的囊殖（zhí）子死亡崩解，其周（zhōu）圍（wéi）會發生明顯的（de）嗜酸（suān）性粒細胞和淋巴細胞反應。
貝諾孢子蟲包囊還可寄（jì）生於下列（liè）器官的（de）組織中：肺泡間隔、淋巴結被膜和小（xiǎo）梁、皮下血（xuè）管的中膜和內膜、舌尖（jiān）橫紋肌或舌下結締（dì）組織、喉會厭部粘膜下結締組（zǔ）織（zhī）、氣管粘膜固有層、睾丸（wán）與附（fù）睾間質及胃腸道粘膜等。
診斷（duàn）
(1)用病部（bù）皮膚深層刮取物檢查貝諾孢子蟲包裹及囊殖子；
(2)用病牛血液接種(yongbingniuxueyejiezhong)家兔，在發（fā）熱期做血液塗片5，鏡紅蟲體；
(3)死（sǐ）後（hòu）剖（pōu）檢時在皮（pí）膚、皮下等（děng）部位檢查0.5mm大的白色包囊（náng）結節（jiē）。