大慶地區奶牛隱（yǐn）性乳腺炎流行（háng）病學（xué）調查和主（zhǔ）要致病菌的分離鑒定

奶牛養殖規模（mó）迅速發展,但是由於當地飼養管理水平較（jiào）低,使奶（nǎi）牛隱性乳房炎的發病率居高不下。奶牛隱性乳房炎是製約奶牛行業發（fā）展的重要因素之一,由於發病隱蔽且不易察覺,因此給奶牛養殖業造成了巨大的經濟損失。本實驗（yàn）通過對大慶地區（qū）4個規模牧場奶牛隱性乳腺炎發病情況進行調查,采用流行病學調查法、體細胞計數法、CMT、乳房炎檢測試紙法檢測奶牛隱性乳房炎的發病（bìng）率,統計分析呼倫貝爾各個地區發病率與季度、胎次、泌乳階（jiē）段間的（de）相互關係,分析（xī）其隱性乳房炎發病規律（lǜ）,為研究（jiū）今（jīn）後防控治療奠定基礎（chǔ）;采集四（sì）個地區隱性乳（rǔ）房炎的乳樣進行細菌培養,並（bìng）分離鑒定主要病原菌且進行相關藥物敏感（gǎn）的試驗。下麵大家（jiā）一起（qǐ）來看看。

奶（nǎi）牛（niú）乳腺炎是由病原（yuán）微生物感染而（ér）引起乳房組織及乳頭發炎的一種疾病。奶牛乳腺炎是困擾奶牛業發展的四大疾病（bìng）之首，是最常見、治療花費最高的疾（jí）病之一，尤其是隱（yǐn）形乳腺炎給奶牛場造成較大的經（jīng）濟損失，具有發病隱蔽（bì）性強，發病率高等（děng）特點。現通過調（diào）查大慶地區（qū）規模牧場奶牛隱性乳腺炎發病情（qíng）況，分離主要（yào）致病菌，旨在為（wéi）隱性乳腺炎的（de）防治提供依據。

1　材料與方法1.1試驗對象

大慶地區4個規模牧場653頭泌乳期，未發生臨（lín）床性乳腺炎的荷斯坦奶牛。

1.2試驗材料

丹麥福斯係列奶牛體（tǐ）細胞檢測儀（yí）(FOSSMATIC5000)，平板，培養基，生化鑒定管和藥敏（mǐn）片等其他常規試劑。1.3　　DHI檢測

對（duì）653頭奶牛進行逐頭（tóu）采（cǎi）樣（yàng），並檢查奶（nǎi）樣是否出現（xiàn）異常和奶牛乳房狀態。樣品送往大慶市家畜良種繁育中心進行奶牛體細胞數量檢測，超過25-50萬個／mL即患有奶牛隱性乳（rǔ）腺炎。

1.4　分離純化

將患有隱性乳腺炎奶樣搖勻，分別接種到血瓊脂平板和伊紅美藍瓊脂平板上（shàng），恒溫培養，觀察記錄菌落形態、大小及溶（róng）血情況，接種到（dào）肉湯培養（yǎng）基（jī）中增菌培（péi）養。

1.5　生化鑒定用

觸酶試驗、兔血漿凝固酶試驗、甘露醇發酵實驗等葡萄菌（jun1）屬生化鑒定管進行鑒定。用CAMP試驗、七（qī）葉苷水解試驗、馬尿酸納水解試驗和肉湯生長（zhǎng）試驗做鏈球菌鑒定。三糖鐵斜麵瓊脂畫（huà）線並穿刺培養後，用吲哚、甲（jiǎ）基紅、V-P、枸櫞酸鹽發酵試驗等進行大腸（cháng）埃希菌鑒定。

1.6　藥敏試驗

將分（fèn）離鑒定的葡萄球菌、鏈球菌和（hé）大腸埃希菌分別接種（zhǒng）到肉（ròu）湯（tāng）培養基培養，周圍粘貼藥敏片，培養24h，觀察抑菌的直（zhí）徑。

2.　結果分析　　

2.1　流行病學調查結果

對653頭奶牛進（jìn）行奶牛隱性乳腺炎檢測，發現有362頭患有隱性乳（rǔ）腺炎（yán），占（zhàn）總數的55.　43%，

2..2　細菌分離鑒定結果（guǒ）

在患有隱性乳腺炎的362份奶樣中，分（fèn）離到致病菌148株，其中金黃色（sè）葡萄球（qiú）菌91株，占（zhàn）分離菌株的61.　48%；無（wú）乳鏈球（qiú）菌18株，占分離菌株的12.　16%；停乳鏈球菌21株，占分離菌株的14.　18%；大（dà）腸埃（āi）希菌12株（zhū），占分離菌株的8.　10%；其他（tā）菌6株占4.05%。

2..3　藥敏實驗結果

比較抑菌圈直（zhí）徑大小（xiǎo），判定結果。金黃（huáng）色葡萄菌對環丙沙星、慶大黴素和（hé）頭孢啶的敏感（gǎn）性高，對四環素、紅黴素不同程度耐（nài）藥。無乳鏈球菌對頭孢他啶、克林黴素的（de）敏感性較高，停乳鏈球菌對慶大黴素、克林黴素的（de）敏感性較高，其他抗生素耐藥。大腸埃希菌對卡那黴素、環丙沙星敏感，其他有一定（dìng）程度（dù）的耐藥。四（sì）種細菌均對青黴素耐藥。

3　討論

目前已知奶牛乳腺炎的致病性微生物已超（chāo）過150種，其中包括球菌、杆菌、支（zhī）原體、真菌（jun1）、酵母菌等，大（dà）部分感染是由（yóu）細菌引起的[3]。本實驗在對大慶地區4個規模牧場653頭進行隱性乳腺炎調查發現，奶（nǎi）牛隱（yǐn）性乳腺（xiàn）炎發病率為55.　43%，這與翁春（chūn）玲等（děng）[4]報道的大慶地區奶牛隱性乳腺炎發病率為47.　45%，存在一定差異，可能是調查牧場飼養方式、水（shuǐ）平不同，調查季節、胎次和泌乳（rǔ）時間不同產生。在患（huàn）有奶牛隱性乳腺炎的奶樣中分離得到了（le）四（sì）種（zhǒng）主要致病菌，主要是金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、無乳鏈（liàn）球菌和大腸（cháng）埃希菌，這與李靜（jìng）傑等[5]報（bào）道的（de）奶牛乳房炎（yán）主要致病菌相類似，主要致病菌隨（suí）著乳腺炎防控措施強化、擠奶和環境衛生的改善而發生變化。抗生素作為治療藥物在乳（rǔ）腺炎的治（zhì）療中起到了重要作用，但長期應用（yòng）抗生素導致了耐藥細菌的生成[6]。本（běn）實驗發現的四種致病菌均對青黴素耐藥，說明已（yǐ）經產生耐藥菌株，在治療奶牛乳腺炎時要盡量交叉用藥，少用或禁用抗生素，開辟中草藥、乳植菌（jun1）等新的治療途徑，降低抗生素產生的（de）危害（hài），避免耐藥菌株的出現。